缓冲液参考中心

3/28/2019 10:22:00 AM

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常见生物缓冲液的pH范围
Tris缓冲液的制备 - pH vs. 温度
磷酸盐缓冲液的制备 - 0.2M溶液
柠檬酸 - 磷酸氢二钠缓冲液的配置，pH2.6 - 7.6
柠檬酸 - 柠檬酸钠缓冲液的配置，pH3.0 - 6.2
乙酸钠 - 醋酸缓冲液的配置，pH3.7 - 5.6
磷酸氢二钠 - 磷酸二氢钠缓冲液的配置，pH5.8 - 8.0 （25℃）
咪唑 - 盐酸盐缓冲液的配置，pH6.2 - 7.8 （25℃）
碳酸钠 - 碳酸氢钠缓冲液的配置，pH6.2 - 7.8 （25℃）
缓冲液配置公式

选择正确的缓冲液

基于酸碱性、解离常数（衡量溶液酸碱性、浓度以及温度的系数）、规格、纯度以及精确的应用领域可帮助您选择一款合适的缓冲液。以下表格通过pH与pKa数据的参考，为您提供一些常用缓冲液的配置方案。

缓冲液级别

为满足各种形式的实验需求，我们提供不同纯度与杂质含量的缓冲液试剂。目前有7种不同级别的试剂可以满足基本的实验室需求、帮助建立药品配方与生产、检测痕量金属含量以及生产指定纯度级别的材料。

常用生物缓冲的有效pH范围（25℃, 0.1M)

名称	有效的pH缓冲范围	pKa（20℃）	pKa（25℃）	pKa（37℃）	试剂级	更优级别
MES	5.5-6.7	6.16	6.1	5.97	M105074	M274288
Bis-Tris	5.8-7.2	n/a	6.5	6.36	B105639	B113072
ADA	6.0-7.2	6.65	6.59	6.46	A108964	A108965
ACES	6.1-7.5	6.88	6.78	6.54	A100327	A100328
PIPES	6.1-7.5	6.8	6.76	6.66	P105090	P105092
					P105093	P105091
MOPSO	6.2-7.6	n/a	6.9	6.75	M113008	n/a
Bis-Tris-Propane	6.3-9.5	n/a	6.8，9.0	n/a	B299299	n/a
					B105640
BES	6.4-7.8	7.17	7.09	6.9	B105116	B105117
					B105115
MOPS	6.5-7.9	7.28	7.2	7.02	M105135	M274252
					M105133
TES	6.8-9.2	7.5	7.4	7.16	T105113	T105114
HEPES	6.8-8.2	7.55	7.48	7.31	H109407	H109408
					H109406
DIPSO	7.0-8.2	n/a	7.6	7.35	B113022	n/a
MOBS	6.9-8.3	n/a	7.6	n/a	M120630	n/a
TAPSO	7.0-8.2	n/a	7.6	7.39	T113029	n/a
Tris	7.0-9.0	8.2	8.06	7.72	T110600	T110602
						T110599
						T110598
						T274227
						T274250
						T110601
HEPPSO	7.1-8.5	n/a	7.8	6.66	H113003	n/a
POPSO	7.2-8.5	n/a	7.8	7.63	P105272	n/a
TEA	7.3-8.3	n/a	7.8	n/a	T108151	n/a
					T108154
EPPS	7.3-8.7	n/a	8	n/a	H110899	H110901
					H110900
Tricine	7.4-8.8	8.16	8.05	7.8	T100351	T118067
					T100350
Gly-gGly	7.5-8.9	n/a	8.2	n/a	G105429	G119491
						G119492
						G119491
Bicine	7.6-9.0	8.35	8.26	8.04	B110905	B110906
HEPBS	7.6-9.0	n/a	8.3	n/a	H113002	n/a
TAPS	7.7-9.1	8.49	8.4	8.18	T108961	T108963
					T108962
AMPD	7.8-9.7	n/a	8.8	n/a	A106026	n/a
TABS	8.2-9.6	n/a	8.9	n/a	T329718	n/a
AMPSO	8.3-9.7	n/a	9	9.1	A120640	n/a
CHES	8.6-10.0	9.55	9.49	9.36	C110897	n/a
					C110898
CAPSO	8.9-10.3	n/a	9.6	9.43	C105213	n/a
AMP	9.0-10.5	n/a	9.7	n/a	A140833	n/a
					A100592
CAPS	9.7-11.1	10.56	10.4	10.02	C105209	n/a
					C105210
CABS	10.0-11.4	n/a	10.7	n/a	C120628	n/a

TRIS缓冲液配置指导 - pH vs.温度

pH 在不同温度下的变化			g/L 0.5M溶液
5℃	25℃	37℃	Tris-HCl	Tris base
7.76	7.2	6.91	7.02	0.67
7.89	7.3	7.02	6.85	0.8
7.97	7.4	7.12	6.61	0.97
8.07	7.5	7.22	6.35	1.18
8.18	7.6	7.3	6.06	1.39
8.26	7.7	7.4	5.72	1.66
8.37	7.8	7.52	5.32	1.97
8.48	7.9	7.62	4.88	2.3
8.58	8	7.71	4.44	2.65
8.68	8.1	7.8	4.02	2.97
8.78	8.2	7.91	3.54	3.34
8.88	8.3	8.01	3.07	3.7
8.98	8.4	8.1	2.64	4.03
9.09	8.5	8.22	2.21	4.36
9.18	8.6	8.31	1.83	4.65
9.28	8.7	8.42	1.5	4.9
9.36	8.8	8.51	1.23	5.13
9.47	8.9	8.62	0.96	5.32
9.56	9	8.7	0.76	5.47

磷酸盐缓冲液配置指导 - 0.2M 溶液

磷酸二氢钾无水物 g/L	磷酸氢二钠七水合物	23℃ pH	磷酸二氢钾无水物 g/L	磷酸氢二钠七水合物	23℃ pH
22.4	3.49	5.7	10.8	29.51	6.9
22.08	4.29	5.8	9.36	32.73	7
21.6	5.37	5.9	7.92	35.95	7.1
21.05	6.6	6	6.72	38.63	7.2
20.4	8.05	6.1	5.52	41.31	7.3
19.56	9.93	6.2	4.56	43.46	7.4
18.6	12.07	6.3	3.84	45.07	7.5
17.64	14.22	6.4	3.12	46.68	7.6
16.44	16.9	6.5	2.52	48.55	7.7
15	20.12	6.6	2.04	49.09	7.8
13.56	23.34	6.7	1.68	49.89	7.9
12.24	26.29	6.8	1.27	50.81	8

醋酸-磷酸氢二钠缓冲液配置，pH 2.6-7.6

一水柠檬酸，C6H8O7 • H2O，MW 210.14；0.1M 含量为21.01 g/L。磷酸氢二钠，MW 141.98； 0.2M 含量为28.40 g/L，或者磷酸氢二钠二水合物，MW 178.05；0.2M 含量为35.61 g/L。

当X mL 0.1M-醋酸和Y mL 0.2M-磷酸氢二钠混合时

pH	X mL 0.1M-醋酸	Y mL 0.2M-碳酸氢二钠
2.6	89.1	10.9
2.8	84.15	15.85
3	79.45	20.55
3.2	75.3	24.7
3.4	71.5	28.5
3.6	67.8	32.2
3.8	64.5	35.5
4	61.45	38.55
4.2	58.6	41.4
4.4	55.9	44.1
4.6	53.25	46.75
4.8	50.7	49.3
5	48.5	51.5
5.2	46.4	53.6
5.4	44.25	55.75
5.6	42	58
5.8	39.55	60.45
6	36.85	63.15
6.2	33.9	66.1
6.4	30.75	69.25
6.6	27.25	72.75
6.8	22.75	77.25
7	17.65	82.35
7.2	13.05	86.95
7.4	9.15	90.85
7.6	6.35	93.65

醋酸-柠檬酸钠缓冲液配置，PH 3.0-6.2

一水柠檬酸，C6H8O7 • H2O，MW 210.14；0.1M 含量为21.01 g/L。柠檬酸三钠二水合物，C6H5O7Na3•2H2O，MW 294.12；0.1M 含量为29.41 g/L。

当X mL 0.1M-醋酸和Y mL 0.1M-柠檬酸三钠混合时

pH	X mL 0.1M-醋酸	Y mL 0.1M-柠檬酸三钠
3	82	18
3.2	77.5	22.5
3.4	73	27
3.6	68.5	31.5
3.8	63.5	36.5
4	59	41
4.2	54	46
4.4	49.5	50.5
4.6	44.5	55.5
4.8	40	60
5	35	65
5.2	30.5	69.5
5.4	25.5	74.5
5.6	21	79
5.8	16	84
6	11.5	88.5
6.2	8	92

醋酸钠-醋酸缓冲液配置，PH 3.7 - 5.6

醋酸钠，CH3COONa • 3H2O，MW 136.09；0.2M 含量为27.22 g/L。

X mL 0.2M-NaOAc 和Y mL 0.2M-HOAc 混合时

pH，18℃	X mL 0.2M-醋酸钠	Y mL 0.2M-冰醋酸
3.7	10	90
3.8	12	88
4	18	82
4.2	26.5	73.5
4.4	37	63
4.6	49	51
4.8	59	41
5	70	30
5.2	79	21
5.4	86	14
5.6	91	9

碳酸氢二钠-碳酸二氢钠缓冲液配置，PH 5.8-8.0 25℃

Na2HPO4 • 2H2O, MW 178.05；0.2M 含量为35.61 g/L。Na2HPO4 • 12H2O，MW 358.22； 0.2M 含量为71.64 g/L。NaH2PO4 • H2O，MW 138.01；0.2M 含量为27.6 g/L。NaH2PO4 • 2H2O，MW 156.03；0.2M 含量为31.21 g/L。

X mL 0.2M-磷酸氢二钠，Y mL 0.2M-磷酸二氢钠；用水稀释至100mL

pH，25℃	X mL 0.2M-磷酸氢二钠	Y mL 0.2M-磷酸二氢钠
5.8	4	46
6	6.15	43.85
6.2	9.25	40.75
6.4	13.25	36.75
6.6	18.75	31.25
6.8	24.5	25.5
7	30.5	19.5
7.2	36	14
7.4	40.5	9.5
7.6	43.5	6.5
7.8	45.75	4.25
8	47.35	2.65

咪唑-HCl 缓冲液配置，PH 6.2 - 7.8 25℃

咪唑，C3H4N2，MW 68.08

25mL 0.2M-咪唑（13.62 g/L），X mL 0.2M-HCl，用水稀释至100mL

pH, 25℃	X mL 0.2M-HCl
6.2	21.45
6.4	19.9
6.6	17.75
6.8	15.2
7	12.15
7.2	9.3
7.4	6.8
7.6	4.65
7.8	3

碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液配置，PH 9.2 -10.8

Na2CO3 • 10H2O，MW 286.2；0.1M 含量为28.62 g/L。NaHCO3， MW 84.0；0.1M 含量为8.40 g/L。

X mL 0.1M-碳酸钠和Y mL 0.1M-碳酸氢钠混合时

20℃	37℃
X mL 0.1M-碳酸钠	Y mL 0.1M-碳酸氢钠
9.2	8.8
9.4	9.1
9.5	9.4
9.8	9.5
9.9	9.7
10.1	9.9
10.3	10.1
10.5	10.3
10.8	10.6

缓冲液制备的配方与方式

质量分数（w/v)

（缓冲液所需百分比/100）× 最终缓冲液体积（mL）= 最初所需原料的质量（g）

配置摩尔浓度

所需的物质的量浓度 × 分子量 × 溶液最终体积（L) = 所需的质量（g）

亨德森-哈塞尔巴尔赫方程